Аллергочип ALEX²

Тест для диагностики аллергии, известный как ALEX (Allergy Explorer), был разработан австрийской компанией Macro Array Diagnostics (MADx). На сегодняшний день широко используется его усовершенствованная версия – ALEX² Allergy Explorer. Упоминание "Allergy Explorer" в названии подчеркивает широту охвата определяемых аллергенов, что является ключевым клиническим преимуществом. Разработка европейской компанией (Австрия), начатая в 2016 году для первой версии, указывает на соответствие стандартам качества Европейского союза в области медицинской диагностики. Эволюция от первой версии ALEX к ALEX² свидетельствует о непрерывном совершенствовании технологии, включая расширение панели аллергенов и улучшение диагностических возможностей.

Принцип действия и технология Алекс 2

В основе теста Алекс 2 лежит метод многокомпонентного твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Ключевой особенностью является использование запатентованной технологии наночастиц (nano-bead technology) для иммобилизации аллергенов. Это позволяет одновременно определять как общий иммуноглобулин E (tIgE), так и специфические иммуноглобулины E (sIgE) к широкому спектру аллергенных экстрактов и отдельных молекулярных компонентов. Система ALEX² способна выявлять антитела к 117 экстрактам аллергенов и 178 их молекулярным компонентам.
Важным технологическим усовершенствованием является интегрированная CCD-ингибиция – подавление реакции с перекрестно-реактивными карбогидратными детерминантами (CCD). CCD присутствуют во многих растениях и некоторых ядах насекомых, и антитела к ним могут приводить к ложноположительным результатам на многие аллергены, не имеющие клинического значения. Блокировка этих реакций в процессе анализа повышает специфичность и диагностическую ценность теста, особенно у полисенсибилизированных пациентов и при диагностике аллергии к растительной пище. Считывание результатов анализа осуществляется методом колориметрии.
Сочетание определения sIgE к экстрактам (дают общую картину сенсибилизации) и молекулярным компонентам (позволяют уточнить истинную причину, выявить риск тяжелых реакций и перекрестную реактивность) на одной платформе является значительным преимуществом. Применение нанотехнологий увеличивает площадь поверхности для реакции, что потенциально повышает чувствительность и позволяет использовать меньший объем сыворотки крови.

Назначение анализа «Alex»

Спектр выявляемых аллергенов
Тест ALEX² охватывает около 300 аллергенов, включая 117 экстрактов и 178 молекулярных аллергенных компонентов. Панель включает широкий спектр ингаляционных аллергенов (пыльца трав, деревьев, сорняков; плесень и дрожжи; эпителий и шерсть животных; клещи домашней пыли), пищевых аллергенов (зерновые, семена, фрукты, овощи, яйца, молоко, бобовые, орехи, мясо, рыба, морепродукты, специи), яды насекомых и латекс.
Особое значение имеет возможность определения sIgE к отдельным белкам-аллергенам (молекулярная аллергодиагностика). Среди них такие важные маркеры, как PR-10 протеины (например, Bet v 1 березы), профилины, липокалины, сывороточные альбумины, неспецифические белки-переносчики липидов (nsLTP) и другие. Включение более 50 уникальных молекулярных аллергенов в ALEX² дает преимущество в сложных случаях, позволяя выявлять специфические маркеры тяжести реакций или перекрестной реактивности. Например, анализ на молекулярном уровне позволяет не просто констатировать сенсибилизацию к арахису, но и определить, к каким именно белкам (например, Ara h 2 – маркер системных реакций, Ara h 8 – маркер перекрестной реактивности с пыльцой) есть антитела, что напрямую влияет на диетические рекомендации и оценку риска.

Роль в диагностике аллергических заболеваний

Анализ ALEX используется для диагностики аллергических заболеваний I типа (IgE-опосредованных). Он помогает установить причину аллергических реакций, идентифицировать специфические триггеры и получить практически полную картину сенсибилизации пациента («аллергопаспорт»). Тест особенно важен для полисенсибилизированных пациентов, реагирующих на множество аллергенов.
Ключевым преимуществом является способность дифференцировать истинную (первичную) сенсибилизацию от перекрестной реактивности благодаря анализу молекулярных компонентов. Это позволяет оценить риск развития тяжелых системных реакций (включая анафилаксию) на пищевые и другие аллергены, разработать точные диетические рекомендации и выбрать компоненты для аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ), а также спрогнозировать ее эффективность. Тест применяется в диагностике аллергического ринита, бронхиальной астмы, атопического дерматита и пищевой аллергии. Количественная оценка уровней sIgE к отдельным молекулам (например, Ara h 2 для арахиса) в некоторых случаях может служить прогностическим маркером вероятности и тяжести клинических реакций. Также тест может выявить асимптоматическую сенсибилизацию, которая в будущем может развиться в клинически выраженную аллергию.

Показания к назначению анализа Алекс

Тест Алекс рекомендуется при наличии разнообразных симптомов, указывающих на возможную аллергическую природу заболевания. К ним относятся:

• Респираторные проявления: хронический или рецидивирующий насморк, заложенность носа, чихание, кашель, одышка, приступы удушья (симптомы бронхиальной астмы), зуд в носу, покраснение, зуд и слезотечение глаз (симптомы аллергического конъюнктивита).
• Кожные проявления: кожная сыпь различного характера, зуд кожи, экзема, атопический дерматит, крапивница, ангионевротический отек.
• Желудочно-кишечные расстройства: боли в животе, тошнота, рвота, диарея, вздутие живота, отек языка или губ после употребления определенных продуктов.

Тест особенно ценен для пациентов с полисенсибилизацией (подозрением на аллергию к нескольким аллергенам одновременно) или в случаях, когда стандартные методы обследования не позволяют точно выявить причинно-значимый аллерген. Другие показания включают:

• Подозрение на перекрестные аллергические реакции.
• Анафилактические реакции в анамнезе, особенно если причина осталась невыясненной.
• Неэффективность текущей противоаллергической терапии или предыдущих методов диагностики.
• Планирование и мониторинг эффективности аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ).
• Обследование детей первого года жизни с атопическим дерматитом для выявления возможной пищевой сенсибилизации.
• Одновременное наличие симптомов аллергии со стороны дыхательных путей и пищеварительной системы.
• Необходимость исключить аллергическую природу заболевания.

Рекомендация теста для детей раннего возраста с атопическим дерматитом подчеркивает его роль в раннем выявлении пищевой сенсибилизации, что позволяет своевременно скорректировать диету и потенциально повлиять на течение "аллергического марша".

Процедура проведения анализа «Alex»

Забор биоматериала
Для анализа ALEX используется венозная кровь. Некоторые источники допускают использование капиллярной крови (из пальца), однако венозная кровь является предпочтительным материалом для большинства лабораторий. Требуется небольшой объем биоматериала: обычно около 100 мкл сыворотки или плазмы (не ЭДТА-плазмы) или 1 мл цельной крови для последующего получения сыворотки. Малый объем крови делает тест удобным для детей и пациентов с затрудненным венозным доступом.

Основные этапы лабораторного исследования
Исследование ALEX представляет собой твердофазный иммуноферментный анализ на специальном макрочипе. Основные этапы включают:

• Подготовка чипа: Аллергены (экстракты и молекулярные компоненты) иммобилизованы на наночастицах, нанесенных на поверхность макрочипа.
• Инкубация с образцом: Сыворотка крови пациента добавляется на чип. Происходит связывание специфических IgE пациента с соответствующими аллергенами на чипе. Одновременно в реакционную смесь добавляется CCD-ингибитор для блокирования неспецифических реакций с карбогидратными детерминантами.
• Промывка: Чип промывается для удаления несвязавшихся компонентов сыворотки.
• Добавление детекторных антител: На чип добавляются меченые ферментом антитела к IgE человека, которые связываются с комплексом «аллерген-IgE».
• Повторная промывка: Удаляются избыточные детекторные антитела.
• Добавление субстрата: Вносится субстрат, который при взаимодействии с ферментом на детекторных антителах изменяет цвет.
• Остановка реакции: Реакция останавливается специальным раствором.
• Анализ результатов: Интенсивность окраски каждой ячейки чипа измеряется колориметрически. Она прямо пропорциональна количеству специфических IgE к данному аллергену в образце крови. Результаты представляются количественно, обычно в килоединицах аллергена на литр (kUA​/L или kU/L).

Автоматизация этапов анализа и использование специализированных считывающих устройств (ридеров) обеспечивают стандартизацию и высокую воспроизводимость результатов.

Подготовка пациента к анализу «Alex»

В большинстве случаев для сдачи анализа ALEX специальная подготовка не требуется.

• Прием пищи: Нет строгой необходимости сдавать кровь натощак. Допускается сдача анализа в течение дня, рекомендуется выдержать интервал в 3-4 часа после последнего приема пищи. Некоторые лаборатории могут придерживаться общих правил забора крови утром натощак.
• Лекарственные препараты: Прием антигистаминных препаратов (противоаллергических средств) не влияет на результаты теста ALEX, и их отмена перед исследованием не нужна. Это является значительным преимуществом перед кожными аллергопробами. Однако, если пациент принимает системные кортикостероидные препараты, рекомендуется проконсультироваться с лечащим врачом, так как они теоретически могут повлиять на результаты исследования из-за своего иммуносупрессивного действия.
• Общие рекомендации: Отдельные лаборатории могут давать общие рекомендации по подготовке к сдаче крови, такие как исключение жирной пищи, алкоголя, интенсивных физических нагрузок и стрессов за 1-2 дня до анализа, а также отказ от курения непосредственно перед процедурой. Эти рекомендации не являются специфическими требованиями самого метода ALEX, но их соблюдение может способствовать получению более точных результатов общеклинических показателей, если они исследуются параллельно.

Заключение

Анализ ALEX / ALEX² представляет собой современный высокотехнологичный инструмент в диагностике IgE-опосредованных аллергических заболеваний. Его способность одновременно определять сенсибилизацию к широкому спектру экстрактов и молекулярных компонентов аллергенов, включая интегрированную CCD-ингибицию, обеспечивает высокую точность и информативность. Тест особенно ценен у полисенсибилизированных пациентов, для дифференциальной диагностики истинной и перекрестной аллергии, а также для подбора АСИТ. Минимальные требования к подготовке пациента, включая отсутствие необходимости отмены антигистаминных препаратов, и малый объем необходимой крови делают его удобным в клинической практике.

Чтобы получить консультацию в Казани или записаться на прием, обращайтесь по тел: +7 (843) 500 54 90, ул. Даурская, д. 12.